ĐÁNH GIÁ ĐỘ AN TOÀN CỦA NMN

Đánh giá tính an toàn của việc sử dụng đường uống NMN ở đàn ông và phụ nữ trưởng thành khỏe mạnh

Được nghiên cứu bởi: Yuichiro Fukamizu1, Yoshiaki Uchida1, Akari Shigekawa1, Toshiya Sato1, Hisayuki Kosaka2 & Takanobu Sakurai1*

Sự giảm nồng độ nicotinamide adenine dinucleotide (NAD+) nội bào, một chất thiết yếu coenzym cho hoạt động trao đổi chất, gây ra nhiều bệnh liên quan đến tuổi tác và các bất thường về chuyển hóa. Cả nghiên cứu in-vivo và in-vitro đều chỉ ra rằng việc tăng nồng độ NAD+ nhất định trong tế bào hoặc mô bằng cách bổ sung nicotinamide mononucleotide (NMN), tiền chất của NAD+, giúp giảm bớt các bệnh liên quan đến sự lão hóa, già hóa và rối loạn chuyển hóa.

Trong những năm gần đây, một số thử nghiệm lâm sàng đã được thực hiện để làm sáng tỏ hiệu quả của NMN ở người. Tuy nhiên, các nghiên cứu lâm sàng trước đây với NMN đã không báo cáo về sự an toàn của việc uống lặp lại hàng ngày ≥ 1000 mg/lần ở nam giới trưởng thành khỏe mạnh và phụ nữ và các thử nghiệm lâm sàng trên người về độ an toàn của NMN còn hạn chế. Vì vậy, chúng tôi tiến hành nghiên cứu ngẫu nhiên, Nghiên cứu nhóm song song, mù đôi, có đối chứng với giả dược để đánh giá độ an toàn của 1250 mg β-NMN dùng đường uống một lần mỗi ngày trong tối đa 4 tuần ở 31 người đàn ông và phụ nữ trưởng thành khỏe mạnh ở độ tuổi 20–65. Sử dụng β-NMN qua đường uống không dẫn đến những thay đổi vượt quá các biến thể sinh lý ở nhiều các thử nghiệm lâm sàng, bao gồm nhân trắc học, huyết học, sinh hóa, nước tiểu và thành phần cơ thể phân tích. Hơn nữa, không có tác dụng phụ nghiêm trọng nào được quan sát thấy trong thời gian nghiên cứu. Kết quả của chúng chỉ ra rằng β-NMN an toàn và được dung nạp tốt ở đàn và phụ nữ trưởng thành khỏe mạnh với liều uống 1250mg một lần mỗi ngày trong tối đa 4 tuần.

Nicotinamide adenine dinucleotide (NAD+) từ lâu đã được biết đến như một coenzym cho các phản ứng oxi hóa khử khác nhau trong cơ thể. Con đường tạo năng lượng chính như đường phân, mạch TCA và quá trình oxy hóa beta1,2. Ngoài ra, NAD+ được sử dụng làm chất nền cho họ sirtuin (SIRT1-7) của deacetylase/deacylase phụ thuộc NAD+, poly ADP-ribose polymerase (PARP) và cụm biệt hóa 38 (CD38), xúc tác cho quá trình tổng hợp và thủy phân ADP-ribose mạch vòng (cADPR). Do đó, NAD+ tham gia vào các hiện tượng sống khác nhau như sửa chữa DNA, sửa đổi sau dịch mã của protein, cơ chế điều hòa gen biểu sinh và nhịp sinh học3–8. Hơn nữa, các nghiên cứu gần đây đã chỉ ra rằng sinh vật nhân chuẩn đã giảm mức NAD+ khi lão hóa trong giới hạn mô hoặc tế bào. Đối với chuột, việc giảm nồng độ NAD+ liên quan đến tuổi tác đã được thể hiện ở cơ xương và một số mô mỡ, cũng như ở vùng hải mã của não⁹. Giảm nồng độ NAD+ nội bào ảnh hưởng đến hoạt động của SIRT1 và các enzym trong con đường trục vớt NAD+, vốn yêu cầu NAD+ làm đồng sáng lập, và liên quan chặt chẽ đến hội chứng Cockayne10. Xóa Nampt cũng liên quan chặt chẽ với giảm cơ sức mạnh và độ bền, vì nó làm thay đổi cân bằng nội môi Ca2+ và làm giảm chức năng của ty thể^11,12. Do đó, ngăn chặn sự giảm nồng độ NAD+ nội bào có thể giúp ngăn ngừa và điều trị các bệnh này^13,14. Vì NAD+ không thấm qua màng tế bào, người ta cho rằng việc sử dụng trực tiếp NAD+ không hiệu quả tăng mức NAD+ nội bào15, và do đó các nghiên cứu đã cố gắng cải thiện NAD+ nội bào mức độ hấp thu bằng cách quản lý các tiền chất (NMN và NR) của con đường sinh tổng hợp NAD+16.

Bốn con đường trao đổi chất sinh tổng hợp NAD+ khác nhau của động vật có vú đã được xác định. Đầu tiên là con đường denovo bắt nguồn từ L-tryptophan; thứ hai là con đường Preiss-Handler bắt nguồn từ axit nicotinic (NA), và thứ ba là con đường cứu cánh, bắt đầu từ nicotinamide (NAM) và tổng hợp NAD+ thông qua phản ứng enzym hai bước. NAM được chuyển thành NMN. NMN sau đó được sinh tổng hợp thành NAD+ bởi nicotinamide mononucleotide adenylyltransferase (NMNAT) trong bước enzyme thứ hai^1,2,17. Thứ tư là con đường chuyển đổi từ nicotinamide riboside (NR), dạng nucleoside của NMN, là được chuyển đổi thành NMN bởi nicotinamide riboside kinase (NRK1 và NRK2), sau đó là quá trình sinh tổng hợp NAD+ bởi NMNAT¹⁷.

Gần đây, Grozio et al. xác nhận rằng Slc12a8, được biểu hiện cao trong ruột non của chuột, vận chuyển nội bào NMN18. Điều này cho thấy Slc12a8 có thể là protein vận chuyển của NMN. Mặt khác, phân tích thông lượng trao đổi chất NAD + của Liu et al. đã sử dụng tiền chất NAD+ có chứa các đồng vị ổn định cho thấy NMN và NR dùng cho chuột không được chuyển hóa trực tiếp thành NAD+ mà chuyển hóa thành NAM trước khi đến các mô bị hủy hoại trong cơ thể19. Ngoài ra, cũng có báo cáo rằng NAM dùng đường uống là được chuyển đổi thành NA bởi hệ vi sinh vật đường ruột và được hấp thụ từ ruột kết dưới dạng NA 20. Yaku et al. cho thấy rằng bằng miệng NR được quản lý đã được chuyển đổi thành NAM bởi BST1 và sau đó thành NA bởi hệ vi sinh vật ²¹. Những nghiên cứu này cho thấy sự hấp thu các tiền chất NAD+ được quản lý bằng đường uống và quá trình sinh tổng hợp NAD+ liên quan đến các bước chuyển hóa khác nhau và hệ vi sinh vật.

Hơn nữa, một số nghiên cứu đã báo cáo hiệu quả của quản lý NMN trong việc tăng mức độ NAD + trong một số tế bào hoặc mô trong các bệnh và rối loạn khác nhau, bao gồm các bệnh liên quan đến lão hóa²², rối loạn chuyển hóa liên quan đến béo phì^23,24, bệnh thận đái tháo đường²⁵, tổn thương tái tưới máu do thiếu máu cục bộ^26,27, cải thiện chức năng nhận thức và các hành vi giống như trầm cảm^28–30, cải thiện chức năng sinh sản^31,32, kích thích miễn dịch³³ và tác dụng tạo máu³⁴. Tương tự, tiền chất NAD+ nội bào của NR, cũng đã được nghiên cứu trong nhiều nghiên cứu và Mặt trời và cộng sự. phát hiện ra rằng việc bổ sung NR đã cải thiện cân bằng nội môi NAD + trong các tế bào rối loạn mỡ bẩm sinh (DC), rối loạn duy trì telomere, cải thiện tác dụng của NR đối với các tế bào DC và cải thiện hậu quả tế bào do rối loạn chức năng telomere trong các tế bào DC³⁵. Bổ sung NR cũng ngăn ngừa tăng cân ở những con chuột được cho ăn chế độ ăn nhiều chất béo, cũng như tăng độ nhạy insulin và khối lượng ti thể trong cơ xương³⁶. Hơn nữa, Damgaard và cộng sự cho thấy rằng tiêm NR vào tĩnh mạch làm tăng NAD + trong cơ xương chuột mà không ảnh hưởng đến khả năng hô hấp hoặc độ nhạy insulin³⁷. Việc sử dụng NMN và NR đối với loài gặm nhấm, Caenorhabditis elegans (tuyến trùng) và Drosophila melanogaster (ruồi giấm) đã được chứng minh là kéo dài tuổi thọ và giảm bớt sự suy giảm sinh lý liên quan đến tuổi tác^38–40. Trong các báo cáo khác, NMN và NR đã được đề xuất để liên kết với ACE2 và IMPDH, cùng với các protein của virus SARS-CoV-2 (Spro, Mpro, PLpro, RdRp) bằng cách ghép nối phân tử và mô phỏng động lực học, cho thấy hiệu quả điều trị tiềm năng của NMN và NR trong điều trị COVID-19.

Do các hoạt tính sinh học có lợi khác nhau của NMN đã được báo cáo trong cả nghiên cứu in-vivo và in-vitro, một số thử nghiệm lâm sàng trên người đã được thực hiện trong những năm gần đây. Một nghiên cứu đầu tiên đánh giá sự an toàn của thuốc uống đơn liều 100, 250 và 500 mg NMN ở nam giới khỏe mạnh và báo cáo rằng việc uống NMN không tạo ra các giá trị vượt quá giao động sinh lý bình thường trong các xét nghiệm sinh hóa huyết học và lâm sàng⁴².

Hàm lượng khuyến nghị

Một nghiên cứu thứ hai kiểm tra hiệu quả của 250 mg/ngày NMN, dùng đường uống trong 10 tuần, trong việc cải thiện chuyển hóa glucose ở phụ nữ sau mãn kinh thừa cân hoặc béo phì mắc bệnh tiểu đường. Các tác giả đã báo cáo một cải thiện đáng kể (trung bình 25%) về độ nhạy insulin và hấp thu glucose, giảm ở loại 2 bệnh nhân đái tháo đường và tiền đái tháo đường43. Một nghiên cứu thứ ba điều tra hiệu quả của việc uống liều thấp (150 mg hai lần mỗi ngày), liều trung bình (300 mg hai lần mỗi ngày) và liều cao (600 mg hai lần mỗi ngày) NMN hiếu khí khả năng tập thể dục ở nam và nữ vận động viên nghiệp dư khỏe mạnh trong 6 tuần. Nghiên cứu này báo cáo một sự phụ thuộc vào liều lượng tăng khả năng sử dụng oxy của cơ xương và cải thiện khả năng hiếu khí trong quá trình tập luyện⁴⁴. Trong những nghiên cứu này, không có thử nghiệm lâm sàng nào ở người báo cáo bất kỳ thay đổi đáng kể nào về thành phần cơ thể hoặc nghiêm trọng các sự kiện bất lợi trong thời gian nghiên cứu^42–44.

Tuy nhiên, các nghiên cứu lâm sàng trước đây với NMN đã không báo cáo về sự an toàn của việc uống lặp lại hàng ngày ≥ 1000 mg/lần^42–44. Trong những năm gần đây, các chất bổ sung NMN đã có mặt trên thị trường và được được tiêu thụ bởi người tiêu dùng trên toàn thế giới như các sản phẩm chăm sóc sức khỏe. Nói chung, NMN có sẵn trên thị trường hàm lượng dao động từ 50 đến 150 mg/viên, nhưng một số người tiêu dùng dùng quá liều nhiều viên cùng một lúc. Hơn nữa, thiếu bằng chứng từ các thử nghiệm lâm sàng trên người và các nghiên cứu tiền lâm sàng để hỗ trợ sự an toàn của NMN được sử dụng trong các sản phẩm này. Do đó, chúng tôi đã thực hiện một nghiên cứu ngẫu nhiên, mù đôi, kiểm soát giả dược, nhóm song song nghiên cứu để đánh giá sự an toàn của 1250 mg NMN khi dùng một lần mỗi ngày trong tối đa 4 tuần ở nam giới và phụ nữ khỏe mạnh.

Phương pháp

Hợp chất thử nghiệm. β-Nicotinamide mononucleotide (NMN) được sản xuất bởi Mitsubishi Corporation Life Science Limited (Tokyo, Nhật Bản). NMN được sử dụng trong thử nghiệm lâm sàng ở người này là dạng tinh thể H+ (C11H16N2O8P).

Thành phần và thành phần dinh dưỡng của thức ăn nghiên cứu và phương pháp liều lượng. Thực phẩm thử nghiệm được cung cấp cho các đối tượng dưới dạng bột đóng gói. Thành phần của các loại thực phẩm thử nghiệm được thể hiện trong Bảng 1. Thành phần dinh dưỡng của thức ăn thử nghiệm được thể hiện trong Bảng 2. Thức ăn thử nghiệm được hòa tan hoàn toàn trong nước (200 ml) và tiêu thụ một lần một ngày.

Thử nghiệm đột biến ngược vi khuẩn (thử nghiệm Ames). Các chủng được sử dụng cho thử nghiệm Ames là Salmonella typhimurium (TA100, TA1535, TA98 và TA1537) và Escherichia coli (WP2uvrA). Sàng lọc cho sự hiện diện của Các đột biến hoàn nguyên do NMN gây ra đã được thực hiện bằng cách tạo phôi trước cho từng chủng có và không có S9Mix, và đánh giá hoạt động trao đổi chất. Nồng độ NMN được đánh giá ở mức 313, 625, 1250, 2500 và 5000 µg/đĩa. Các Nghiên cứu Ames được thực hiện bởi Bozo Research Center, Inc. (Tokyo, Nhật Bản).

 

 

 

 

 

 

 

 

Thiết kế nghiên cứu lâm sàng ở người.

Số lượng đối tượng trong nghiên cứu này được thiết lập dựa trên số lượng của các đối tượng trong các thử nghiệm lâm sàng NMN trước đây⁴². Một nhóm ngẫu nhiên, mù đôi, kiểm soát giả dược, song song nghiên cứu được thực hiện trên 31 người đàn ông và phụ nữ trưởng thành khỏe mạnh ở độ tuổi 20–65 đáp ứng các tiêu chí đủ điều kiện. Các cuộc kiểm tra (nhân trắc học, huyết học, sinh hóa lâm sàng và phân tích nước tiểu) và bảng câu hỏi được được tiêm trước khi nhập viện (ngày 3 tháng 2 năm 2021) và vào tuần 2 (ngày 17 tháng 2 năm 2021), tuần 4 (ngày 3 tháng 3 năm 2021) và sau thời gian quan sát (17 tháng 3 năm 2021) (Hình 1). Trong thời gian can thiệp, hồ sơ hàng ngày được lưu giữ liên quan đến lượng thực phẩm thử nghiệm đã được xác nhận, kinh nguyệt, tình trạng thể chất, điều tra chế độ ăn uống, thuốc men và thực phẩm chức năng (ví dụ: thực phẩm bổ sung). Nghiên cứu trên người này đáp ứng các yêu cầu của CONSORT 2010 và tuân thủ các nguyên tắc đạo đức của Tuyên bố Helsinki. Tất cả các đối tượng đã được đưa ra một lời giải thích đầy đủ về nghiên cứu (mục tiêu, phương pháp nghiên cứu, rủi ro và mối quan tâm về quyền riêng tư) và tất cả các đối tượng được cung cấp thông tin có chữ ký bằng lòng. Nghiên cứu đã được phê duyệt bởi Ủy ban Đánh giá Lâm sàng và Đạo đức của Phòng khám Dị ứng Yoga (4-32-16, Yoga, Setagaya-ku, Tokyo, Japan, jim@medipharma.co.jp) vào ngày 15 tháng 1 năm 2021 và đã đăng ký trên UMIN-CTR (UMIN000043084) trước khi bắt đầu nghiên cứu (21 tháng 1 năm 2021). Nghiên cứu này được thực hiện tại Pharma Foods Công ty TNHH Quốc tế (Kyoto, Nhật Bản).

Tiêu chí loại trừ và ngẫu nhiên của các đối tượng. Tiêu chí loại trừ như sau:

(1) Tiền sử bệnh lý khối u ác tính, suy tim hoặc nhồi máu cơ tim.

(2) Đang điều trị một trong các bệnh mạn tính sau: rung nhĩ, rối loạn nhịp tim,

rối loạn gan, rối loạn thận, rối loạn mạch máu não, thấp khớp, tiểu đường, rối loạn lipid máu, tăng huyết áp và các bệnh mãn tính khác.

(3) Đối tượng đang dùng thuốc (kể cả thuốc nam).

(4) Đối tượng dị ứng với thuốc và sản phẩm liên quan đến thực phẩm thử nghiệm.

(5) Đối tượng đang mang thai, đang cho con bú hoặc dự định có thai.

(6) Đối tượng được bác sĩ đánh giá là không đủ điều kiện tham gia nghiên cứu.

Sau khi áp dụng các tiêu chí loại trừ trên, những người đàn ông và phụ nữ khỏe mạnh đủ điều kiện trong độ tuổi từ 20 đến 65 tuổi được nhận vào nghiên cứu dựa trên kết quả xét nghiệm huyết học (triglyceride, LDL cholesterol, đường huyết lúc đói, HbA1c, AST (GOT), ALT (GPT), γ-GT, nồng độ amylase huyết thanh, creatinine và axit uric) được bác sĩ đánh giá là có thể chấp nhận tham gia nghiên cứu. Đối tượng được chỉ định ngẫu nhiên cho hai nhóm, giả dược và NMN, sử dụng bảng số ngẫu nhiên do người kiểm soát của Pharma Foods International Co., Ltd., người không tham gia vào nghiên cứu. Người kiểm soát đã niêm phong các phiếu phân bổ và cất giữ trong một phong bì cho đến khi phân tích dữ liệu được hoàn thành.

Hướng dẫn người tham gia nghiên cứu.

(1) Tiêu thụ thực phẩm thử nghiệm theo liều lượng và cách dùng quy định.

(2) Tránh uống rượu và ăn quá nhiều từ 1 tuần trước khi nghiên cứu cho đến khi kết thúc nghiên cứu và không thay đổi chế độ ăn uống hoặc cách sống.

(3) Không bắt đầu dùng bất kỳ chất bổ sung mới nào ngoài thực phẩm thử nghiệm trong thời gian nghiên cứu.

(4) Không uống rượu hoặc tập thể dục quá sức vào ngày trước khi thử nghiệm.

(5) Không ăn hoặc uống trong vòng 6 giờ trước khi lấy máu. Đối tượng có thể uống nước lọc nhưng không được uống nước tăng lực.

(6) Trong trường hợp có bất kỳ thay đổi nào về điều kiện vật chất trong thời gian thử nghiệm, tổ chức quản lý thử nghiệm đã ngay lập tức được liên hệ. Các hành động tiếp theo nên được thực hiện theo hướng dẫn từ tổ chức quản lý thử nghiệm.

Điều trị y tế cho các đối tượng trong quá trình nghiên cứu. Thuốc tại chỗ cho các triệu chứng nhỏ, chẳng hạn như cảm lạnh và nhức đầu, đã được cho phép. Khi uống thuốc ghi vào cột xác nhận dùng thuốc của cuốn nhật ký, và lý do dùng thuốc đã được thông báo cho nhóm nghiên cứu.

Kết quả chính. Kết quả chính trong nghiên cứu này gồm các xét nghiệm huyết học, xét nghiệm sinh hóa lâm sàng, hình thể thành phần và các dấu hiệu quan trọng, phân tích nước tiểu, và các tác dụng phụ.

Các biến cố bất lợi. Trong nghiên cứu này, một sự kiện bất lợi được định nghĩa là “sự khởi phát bất thường mới” hoặc “trầm trọng thêm” trong thời gian nghiên cứu. Trong trường hợp xảy ra sự kiện bất lợi, điều tra viên chính đã được thực hiện cần thiết và các biện pháp thích hợp ngay lập tức và quyết định liệu người tham gia có thể tiếp tục nghiên cứu hay không. Hiệu trưởng điều tra viên đã đánh giá mối quan hệ nhân quả giữa các sự kiện bất lợi và thực phẩm thử nghiệm. Kết quả đánh giá cho sự kiện bất lợi đã được báo cáo bằng văn bản.

Phân tích thống kê. Phân tích thống kê được thực hiện bằng SPSS Statistics V25 (IBM) hoặc Microsoft Excel 2016. Phân tích phương sai hai chiều được sử dụng để xác định ý nghĩa thống kê đối với đánh giá an toàn trong nghiên cứu này và bài kiểm tra sau đại học của Dunnett (bài kiểm tra hai phía) được sử dụng để so sánh giá trị ban đầu được đo tại tuần 0 với tất cả các phép đo tiếp theo. So sánh giữa các nhóm được thực hiện bằng cách sử dụng xét nghiệm t không ghép đôi (xét nghiệm hai đuôi) hoặc xét nghiệm t của Welch (số lượng bạch cầu và AST, ALT, γ-GT, chỉ số độ cứng động mạch, đường huyết, nitơ urê, sắt huyết thanh, xeton toàn phần, axit acetoacetic và chỉ axit 3-hydroxybutyric) và phép đo được so sánh ở các tuần 0, 2 và 4 của lượng tiêu thụ và giai đoạn quan sát (tuần 6). Tất cả dữ liệu được thể hiện dưới dạng trung bình ± SD và mức ý nghĩa của so sánh trong nhóm được đặt ở *P < 0,05 hoặc **P < 0,01 so với tuần 0. Mức ý nghĩa của so sánh giữa các nhóm được đặt ở #P < 0,05 hoặc ##P < 0,01 so với giả dược. Ngoài ra, đối tượng tiêu thụ ít hơn 80% thực phẩm thử nghiệm và không tuân thủ các hướng dẫn nghiên cứu là loại trừ khỏi phân tích thống kê.

Kết quả

Thử nghiệm đột biến ngược vi khuẩn (thử nghiệm Ames). Kết quả của bài kiểm tra Ames được trình bày trong Bảng bổ trợ S1. Số lượng khuẩn lạc đột biến hoàn nguyên được điều trị bằng NMN không tăng hơn hai lần so với số lượng đối chứng âm trong bất kỳ chủng nào, bất kể có hay không có hoạt động trao đổi chất. Không có sự gia tăng các khuẩn lạc đột biến hoàn nguyên ở bất kỳ nồng độ xử lý nào (313, 625, 1250, 2500 và 5000 µg/đĩa).

Sàng lọc đối tượng và dữ liệu cơ bản. Đối tượng nghiên cứu được cung cấp đầy đủ thông tin về nghiên cứu mục đích, phương pháp và nội dung, và sự đồng ý tham gia bằng văn bản được lấy từ 34 đối tượng. Các xét nghiệm sàng lọc trước khi nghiên cứu đã được thực hiện vào ngày 27 tháng 1 năm 2021 và hai đối tượng đã bị loại vì họ không đáp ứng các tiêu chí dựa trên kết quả xét nghiệm trong phòng thí nghiệm huyết học của họ. Sau khi sàng lọc, 32 người đàn ông khỏe mạnhvà phụ nữ từ 20 đến 65 tuổi được chọn làm đối tượng. Tỷ lệ nam nữ là 14 nam và 18 phụ nữ. Các đối tượng được chọn được chỉ định ngẫu nhiên vào nhóm giả dược hoặc nhóm NMN bởi một nhân viên thành viên không tham gia nghiên cứu, sử dụng bảng số ngẫu nhiên với các hệ số phân bổ sau: tỷ lệ giới tính, tuổi tác, trọng lượng cơ thể, tỷ lệ mỡ cơ thể, BMI và huyết áp. Bảng phân bổ đã được niêm phong và chỉ được mở sau khi hoàn thành phân tích dữ liệu. Vì một đối tượng đã rút lui vì những lý do không liên quan đến nghiên cứu trước khi bắt đầu nghiên cứu, số đối tượng cuối cùng là 31 (Hình 2). Mười lăm đối tượng đã được bao gồm trong nhóm giả dược, với tỷ lệ nam nữ là bảy nam và tám nữ, trong khi mười sáu đối tượng là được đưa vào nhóm NMN, với tỷ lệ nam/nữ là 7 nam và 9 nữ. Tuổi trung bình, cơ thể cân nặng, tỷ lệ phần trăm mỡ cơ thể, chỉ số BMI, huyết áp tâm thu và huyết áp tâm trương của cả hai các nhóm được liệt kê trong Bảng 3. Trong nghiên cứu này, không có sự không đồng nhất về dữ liệu vật lý của các đối tượng trong cả hai nhóm nhóm (Bảng 3). Tất cả 31 đối tượng tuân thủ các hướng dẫn nghiên cứu trong suốt thời gian can thiệp và do đó, dữ liệu của họ được đưa vào các phân tích tiếp theo (Hình 2). Trong thời gian nghiên cứu, tỷ lệ tiêu thụ trung bình của các loại thực phẩm thử nghiệm là 98,3 ± 4,0% ở nhóm giả dược và 98,9 ± 2,5% ở nhóm NMN (Bảng 3).

Xét nghiệm huyết học. Kết quả của các xét nghiệm huyết học được thể hiện trong Bảng 4. Tất cả các phép đo trong Các nhóm NMN và giả dược nằm trong các giá trị tham chiếu của phòng thí nghiệm lâm sàng và không có ý nghĩa sự khác biệt trong hoặc giữa các nhóm.

Xét nghiệm sinh hóa lâm sàng. Kết quả xét nghiệm sinh hóa lâm sàng được trình bày trong Bảng 5. Chỉ có nhóm giả dược natri cho thấy số lượng giảm đáng kể ở tuần thứ 2 (p = 0,0148) so với tuần 0. Trong nhóm NMN, mức LD (LDH) ở tuần 0 và tổng lượng protein trong thời gian quan sát là đáng kể cao hơn giữa các nhóm so với nhóm giả dược (p = 0,0340 và 0,0310, tương ứng). Ngược lại, A/G tỷ lệ và nồng độ natri trong nhóm NMN ở tuần 0 thấp hơn đáng kể so với nhóm giả dược (p = 0,0345 và 0,0283 tương ứng). Tuy nhiên, tất cả các mục thử nghiệm sinh hóa lâm sàng cho thấy đáng kể sự khác biệt giữa các nhóm trong nghiên cứu này nằm trong các giá trị tham chiếu của phòng thí nghiệm lâm sàng.

Thành phần cơ thể và các dấu hiệu quan trọng. Thành phần cơ thể và dữ liệu dấu hiệu quan trọng được hiển thị trong phần bổ sung Bảng S2. Tất cả các phép đo trong nhóm NMN và giả dược đều nằm trong các giá trị tham chiếu của phòng thí nghiệm lâm sàng, và không có sự khác biệt đáng kể trong hoặc giữa các nhóm.

Phân tích nước tiểu. Kết quả phân tích nước tiểu được thể hiện trong Bảng bổ trợ S3 và S4. Về đạm niệu (tuần 0 và tuần 4, giai đoạn quan sát) và mức urobilinogen (tuần 0), kết quả của một số đối tượng là nằm ngoài các giá trị tham chiếu trong phòng thí nghiệm lâm sàng ở cả nhóm giả dược và nhóm NMN. Đối với urobilinogen (tuần 2), máu ẩn trong nước tiểu (tuần 2 và giai đoạn quan sát), glucose trong nước tiểu (tuần 0) và thể ceton trong nước tiểu (tuần 2 và 4), có những đối tượng có kết quả chỉ nằm ngoài giá trị tham chiếu của phòng thí nghiệm lâm sàng trong nhóm giả dược. Các kết quả về bilirubin trong nước tiểu của cả hai nhóm đều nằm trong tài liệu tham khảo của phòng thí nghiệm lâm sàng các giá trị. Không có sự khác biệt đáng kể về trọng lượng riêng của nước tiểu và pH nước tiểu trong hoặc giữa các nhóm trong quá trình nghiên cứu.

Các biến cố bất lợi. Các báo cáo về biến cố bất lợi trong thời gian nghiên cứu được trình bày trong Bảng 6. Năm biến cố bất lợi các sự kiện đã được quan sát trong thời gian nghiên cứu, nhưng điều tra viên chính của nghiên cứu đã xác định rằng không có mối quan hệ nhân quả trực tiếp giữa việc sử dụng thực phẩm thử nghiệm và bất kỳ tác dụng phụ nào.

Cuộc thảo luận

Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã đánh giá mức độ an toàn của việc sử dụng NMN ở nam giới và phụ nữ trưởng thành khỏe mạnh. Phát hiện của chúng tôi tiết lộ rằng uống 1250mg NMN, khi dùng một lần mỗi ngày trong tối đa 4 tuần, là an toàn và dung nạp tốt ở nam giới và phụ nữ trưởng thành khỏe mạnh. NMN được sản xuất bởi Mitsubishi Corporation Life Science Giới hạn sử dụng trong nghiên cứu này không thể hiện tính gây đột biến trong thử nghiệm Ames. Kết quả này giống với báo cáo bởi Cros et al.45, gợi ý rằng NMN là một hợp chất không gây đột biến. Một nghiên cứu lâm sàng trên người về sự an toàn của NMN đã được báo cáo bởi Irie và cộng sự, người đã thực hiện một liều uống duy nhất nghiên cứu về NMN (100mg, 250mg và 500mg) ở nam giới khỏe mạnh và chứng minh sự an toàn của liều uống duy nhất lên đến 500mg⁴². Trong nghiên cứu của chúng tôi, không có tác dụng phụ nào được quan sát thấy ngay cả sau 4 tuần uống lặp lại dùng 1250mg NMN mỗi ngày một lần, liều cao so với liều uống duy nhất 500mg. nghiên cứu của chúng tôi cũng đánh giá cả nam giới và phụ nữ khỏe mạnh. Kết quả của chúng tôi chỉ ra rằng uống NMN không có bất kỳ tác dụng phụ nào đối với cơ thể ở nam giới hoặc nữ giới khỏe mạnh. Trong báo cáo của họ, Irie et al. và ghi nhận một ý nghĩa quan trọng tăng tổng nồng độ bilirubin trong huyết thanh trong các giá trị tham chiếu của phòng thí nghiệm lâm sàng. Iri et al. mô tả một ý nghĩa giảm lượng đường trong máu và clorua máu khi uống NMN trong các giá trị tham chiếu của phòng thí nghiệm lâm sàng, nhưng nghiên cứu của chúng tôi không quan sát thấy bất kỳ sự giảm đáng kể nào trong các dữ liệu phòng thí nghiệm này. creatinin máu được biết đến là một chỉ báo về chức năng thận, và trong một đánh giá độc tính bán cấp của NMN (1340mg/ngày) ở chó beagle của bạn và cộng sự, sự gia tăng đáng kể nồng độ creatinine trong máu đã được quan sát thấy ở nhóm NMN⁴⁶, cho thấy rằng việc uống NMN liều cao (1340mg/ngày) có tác dụng phụ nhẹ đối với thận ở những người chó beagle. Tuy nhiên, trong báo cáo của Irie et al. (500mg/ngày) và nghiên cứu hiện tại của chúng tôi (1250mg/ngày), không có sự gia tăng đáng kể nồng độ creatinine trong máu khi uống NMN42. Do đó, chúng tôi cho rằng việc sử dụng NMN bằng đường uống ở người có tác dụng phụ thấp đối với chức năng thận.

Các nghiên cứu về hiệu quả trên người của Yoshino et al. và Liao et al. cũng xác nhận các đánh giá an toàn bổ sung ở phụ nữ sau mãn kinh mắc bệnh tiểu đường thừa cân hoặc béo phì, không có báo cáo nào về cơ thể thay đổi thành phần hoặc các sự kiện nghiêm trọng^43,44. Tương tự, chúng tôi không quan sát thấy bất kỳ thay đổi nào về thành phần cơ thể hoặc các sự kiện bất lợi nghiêm trọng trong quá trình nghiên cứu của chúng tôi ở nam giới và phụ nữ trưởng thành khỏe mạnh. Điều này cho thấy rằng NMN có thể an toàn dùng đường uống mà không làm thay đổi thành phần cơ thể ở người lớn khỏe mạnh và bệnh nhân béo phì và glucose các bệnh chuyển hóa.

Trong những năm gần đây, việc sử dụng NR qua đường uống, là chất trung gian cho quá trình sinh tổng hợp NAD+ tương tự như NMN, đã được báo cáo là làm tăng nồng độ NAD+ trong máu47. Tính an toàn của việc uống NR ở người cũng đã được chứng minh. được đánh giá. Conze et al. đã đánh giá động học, sự phụ thuộc vào liều lượng và độ an toàn của việc uống NR clorua (100, 300 và 1000mg) ở nam giới và phụ nữ trưởng thành thừa cân khỏe mạnh⁴⁸. Họ không báo cáo bất kỳ tác dụng phụ nghiêm trọng nào sự kiện hoặc đỏ bừng mặt. Dollerup và cộng sự. đã thử nghiệm tính an toàn và khả năng cải thiện độ nhạy insulin và các thông số trao đổi chất khác ở nam giới béo phì kháng insulin sau khi dùng 2000mg (1000mg × 2/ngày)NR liều cao trong 12 tuần để kiểm tra độ an toàn và khả năng cải thiện độ nhạy insulin và các quá trình trao đổi chất khác thông số⁴⁹. Kết quả xác nhận đã xác nhận rằng không có tác dụng phụ nghiêm trọng nào khi bổ sung NR, và xét nghiệm máu là tiêu chuẩn. Do đó, tương tự như kết quả của các nghiên cứu lâm sàng trên người về việc sử dụng NR ở trên 1000mg/ngày, không có tác dụng phụ nghiêm trọng nào được quan sát thấy đối với lượng NMN ≥ 1000mg/lần trong nghiên cứu này.

Nicotinamide (NAM) và axit nicotinic (NA) đã có mặt trên thị trường thế giới dưới dạng thực phẩm bổ sung. Tuy nhiên, liều cao của NAM và NA đã được báo cáo là gây độc cho gan ở người^50,51, và một tác dụng phụ của chứng đỏ bừng do giãn mạch do lượng NA cao đã được chứng minh⁵². Liều dung nạp trên của NAM và NA cho người do Ủy ban Châu Âu và Chuyên gia Vitamin và Khoáng chất Vương quốc Anh xác lập lần lượt là 900mg/ngày và 10mg/ngày⁵³. Các kết quả hiện tại chỉ ra rằng NMN, cùng một tiền chất NAD+ dưới dạng NAM và NA, có thể dùng đường uống cho người với liều 1250mg một lần mỗi ngày trong tối đa 4 tuần mà không cần gây nhiễm độc gan và giãn mạch, và được cho là có giới hạn chịu đựng trên cao hơn so với đến NAM và NA.

Các tiền chất của NAD+ như NMN hiện diện với lượng rất nhỏ trong thực phẩm³⁹. Tuy nhiên, kể từ khi chúng được hiển thị trải qua quá trình phân hủy do đun nóng, không chắc cơ thể nhận được những chất này qua đường miệng khi ăn thức ăn nấu chín⁵⁴. Vì vậy, trong quá trình uống xuyên suốt thời gian can thiệp, ảnh hưởng trực tiếp đến NMN học ăn vào từ các chế độ ăn khác với thực phẩm thử nghiệm có thể được cho là không đáng kể.

Có một số hạn chế đối với nghiên cứu của chúng tôi. Đầu tiên, phân tích chuyển hóa của NMN và các chất chuyển hóa của nó, chẳng hạn như dưới dạng NAD+, NAM, NR, N-metyl-2-pyridone-5-carboxamit (2Py) và N-metyl-4-pyridon-5-carboxamit (4Py), mẫu máu và nước tiểu không được thực hiện trong thời gian nghiên cứu. Phân tích trao đổi chất có thể xác nhận tính khả dụng sinh học của NMN và sự sắp xếp các chất chuyển hóa NMN trong cơ thể khi các cá nhân quản lý NMN và dự kiến sẽ cung cấp thêm dữ liệu để hỗ trợ sự an toàn của việc sử dụng NMN qua đường uống. Thứ hai, các xét nghiệm thành phần cơ thể, huyết học, sinh hóa lâm sàng và phân tích nước tiểu được sử dụng làm tiêu chí cho an toàn trong nghiên cứu này. Ngoài các xét nghiệm lâm sàng này, các xét nghiệm sinh lý lâm sàng như MRI, ECG, Điện não đồ, và nếu có thể, nên thực hiện các xét nghiệm mô học bằng sinh thiết để xác minh toàn diện tính an toàn của NMN. Cuối cùng, nghiên cứu của chúng tôi tương đối nhỏ và thực hiện phân tích chi tiết hơn về lượng NMN quá mức, một cần có số lượng đối tượng lớn hơn hoặc nghiên cứu an toàn khi sử dụng trong thời gian dài hoặc nghiên cứu thuần tập.

NMN có trong các loại thực phẩm tự nhiên như edamame (đậu nành non), bông cải xanh, bơ, cà chua, và sữa, nhưng lượng tiêu thụ trong chế độ ăn bình thường có thể ít hơn 2mg/ngày^16,39,43. thật khó để tiêu thụ hơn 250mg/ngày NMN trong chế độ ăn uống bình thường, đây là lượng tiêu thụ được thiết lập trong NMN trước đó thử nghiệm lâm sàng^42–44. Do đó, việc bổ sung NMN từ thực phẩm bổ sung có hàm lượng NMN cao là rất hiệu quả. Trong những năm gần đây, việc thương mại hóa NMN như một loại thực phẩm bổ sung đã được mở rộng trên toàn cầu. thị trường, nhưng bằng chứng về sự an toàn của NMN ở người còn hạn chế. Trong nghiên cứu lâm sàng trên người này, NMN được sản xuất bởi Mitsubishi Corporation Life Science Limited đã được chứng minh là an toàn và dung nạp tốt qua đường uống liều 1250mg một lần mỗi ngày trong tối đa 4 tuần.

Nghiên cứu này được thực hiện tại Pharma Foods Co., Ltd. được tài trợ bởi Mitsubishi Corporation Life Sciences Limited. Mitsubishi Corporation Life Sciences Limited đã cung cấp các mẫu thực phẩm thử nghiệm, bao gồm NMN, nhưng không tham gia vào việc tiến hành và phân tích dữ liệu của nghiên cứu lâm sàng ở người. Y. Fukamizu, Y. Uchida, A. Shigekawa, T. Sato và T. Sakurai là nhân viên của Mitsubishi Corporation Life Sciences Limited. H. Kosaka là bác sĩ tại Bệnh viện Takaishi Fujii và là điều tra viên chính trong nghiên cứu này.

Tham khảo thêm về việc gia công viên uống NMN